超濾技術分離制備小麥蛋白肽項目通過鑒定
2014-05-17 16:24:53
admin
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據中國生物技術信息網2008年9月2日訊 日前，由江南大學承擔的小麥蛋白肽制備新技術通過了教育部科技發展中心組織的鑒定。據悉，本項目以小麥面筋蛋白為原料，采用現代生化分離手段結合酶技術對小麥面筋蛋白中的酶解産物進行分離提取、富集純化，并對其生物學特性進行研究，提出以小麥面筋蛋白為原料深度開發具有明确阿片活性和氨基酸序列的小麥蛋白功能肽的新思路，為提高小麥面筋蛋白的利用率提供了新的方法，填補了國内在這一領域的空白。
項目采用堿性蛋白酶、胃蛋白酶、複合蛋白酶（胃蛋白酶＋胰蛋白酶）水解制備得到了三種面筋蛋白酶解物（AWGH、PWGH和PPWGH）經豚鼠回腸離體檢定和NG108-15細胞生物學檢定，均具有較好的阿片活性，其IC50值分别為1.21±0.25、1.57±0.21和1.29±0.38mg蛋白/mL。AWGH對腺苷酸環化酶（AC）的活性具有刺激作用，而PWGH和PPWGH則對AC的活性具有抑制作用，其AC抑制率分别為39.66%和50.13%。AWGH和PPWGH經過特定離子交換樹脂脫鹽處理和超濾處理後，所得小麥面筋蛋白源阿片肽蛋白質含量提高到90%以上，且阿片活性有較大的提高，AWGH和PPWGH的IC50值分别約減小至處理前的1/2和1/3。通過凝膠過濾色譜、半制備RP-HPLC和RP-HPLC分離純化，從AWGH中得到一個具有較強阿片活性的組分AWGH-C14-1，從PPWGH中得到兩個具有較強阿片活性的組分PPWGH-c4-1和PPWGH-c10-2，其氨基酸序列分别為LSPHK、GCKSPH和APSAPT。